Báo cáo Chẩn đoán bệnh dại

Trường ĐH Nông Lâm TP.HCMBộ môn CNSHBài báo cáo  CHẨN ĐOÁN BỆNH DẠI (RABIES VIRUS) GVHD T.S Nguyễn Ngọc Hải SV Trương Thị Huyền TrangLớp DH06SHMssv 06126159 Nội dungĐặt vấn đềRabies virusCách gây bệnh của rabies virusCác phương pháp chẩn đoánSo sánh các phương phápKết luậnTài liệu tham khảoI. Đặt vấn đề Bệnh dại là bệnh do virus dại (rabies virus) gây nên Là bệnh nhiễm virus cấp tính của hệ thần kinh trung ươngtử vong chắc chắn. Có tính truyền nhiễm Bệnh chỉ xảy ra trên động vật có vú II. Rabies virus Thuộc •giống Lyssavirus •họ Rhabdoviridae Vật chất di truyền là RNA Có dạng hình viên đạn khi quan sát dưới kính hiển vidễ phân biệt với các virus cùng họ Kích thước xấp xỉ 180 x 75nmII. Rabies virusCấu tao Lõi virus(ribonucleoprotein) Chất nền protein Lớp áo ngoài(envolop) Các gai glycoproteinIII. Cách gây bệnh của rabies virusIV. Các phương pháp chẩn đoán Phương pháp mô bệnh học Phương pháp Taqman PCR Phương pháp chẩn đoán huyết thanhIV. Các phương pháp chẩn đoánPhương pháp mô bệnh học (histopathology)MẫuMảnh mô nhỏNghiềnKháng thể có nhuộm huỳnh quangThể NegriKính hiển vi huỳnh quangTế bào nhiễm virusThể Negri trong tế bào thần kinh nhiễm virus ( mũi tên chỉ)Phương pháp này chỉ phát hiện được khoảng 70% trường hợp nhiễm virusIV. Các phương pháp chẩn đoán2. Phương pháp dùng Taqman PCR Nguyên tắc của phương pháp này là dựa trên phản ứng PCR có bổ sung tác nhân dò Taqman. Phát hiện mục tiêu thông qua cường độ phát huỳnh quang của Taqman.quy trình thực hiện( Taqman PCR)2.1 Ly trích RNA và tạo cDNA Ly trích RNA bằng TRIzol, TRIzol LS với 1l Glycoblue Reverse transcription toàn bộ RNA tạo cDNA 0.5 l random primer cho 1l RNA2.2. Thiết kế mồi và Taqman Đọan mồi được thiết kế đặc hiệu cho vật chất di truyền của virus. Taqman được thiết kế có vài trình tự bắt cặp với cDNA virus Taqman được gắn huỳnh quang ở đầu 5’có hoạt tính, đầu 3’ gắn huỳnh quang không hoạt tínhQuy trình thực hiện( Taqman PCR)2.3.Tiến hành phản ứng 12.5l Taqman2.5l primer 4l nucleotide tự do1l cDNAPCR1 chu kì 500C trong 2 phút1chu kì 950C trong 10 phút40 chu kì 95 0C trong 15s 40 chu kì 600C trong 1 phútIV. Các phương pháp chẩn đoánưu điểm nhanh chóng độ nhạy cao độ đặc hiệu cao cần lượng mẫu ít tương đối dễ thực hiện Phương pháp này phát hiện được trên 95% trường hợp nhiễm virusIV. Các phương pháp chẩn đoán3. Phương pháp chẩn đoán huyết thanh Nguyên tắc của phương pháp này là dựa trên phản ứng ELISA phát hiện kháng thể trong huyết thanh. phương pháp này phát hiện gần 100% trường hợp nhiễm virusV. So sánh giữa các phương pháp Trong 3 phương pháp đã trình bày thì phương pháp chẩn đoán huyểt thanh là cho hiệu quả cao nhất.VI. Kết luận Bệnh dại là một bênh truyền nhiễm có tốc độ lay lan rất nhanh chóng, có tỉ lệ tử vong cao. Do đó cần có phương pháp phòng bệnh, chẩn đoán bênh và điều trị bệnh một cách có hhiệu quả.VII. Tài liệu tham khảo