Tiểu luận Protein tái tổ hợp và virus viêm não Nhật Bản

Bài tiểu luậnPROTEIN TÁI TỔ HỢP VÀ VIRUS VIÊM NÃO NHẬT BẢNNgành : CÔNG NGHỆ SINH HỌCNiên khóa: 2006-2010Sinh viên thực tập: PHAN MINH TIẾNGiáo viên hướng dẫn :NGUYỄN NGỌC HẢII.ĐẶT VẤN ĐỀThời gian gần đây, một căn bệnh của trẻ em đã làm nhiều người quan tâm vì tỉ lệ tử vong cao và những di chứng tàn phế mà bệnh để lại cho trẻ. Đó là bệnh viêm não nhật bản (VNNB).VNNB lưu hành rộng rãi ở Châu Á bao gồm Trung Quốc, Đài Loan, Hàn Quốc, Philippin, vùng Viễn Đông( Liên Xô cũ), tất cả các nước Đông Nam Á và Ấn Độ. Ở Ấn Độ bệnh xảy ra hàng năm với số lượng lớn, có năm lên đến 10000 trường hợp. Ở Việt Nam, bệnh lưu hành rộng rãi và đặc biệt nghiêm trọng ở đồng bằng châu thổ đồng bằng Sông Hồng và trung du thuôc miền bắc Việt Nam với tỉ lệ mắc hàng năm từ 6-10/100000 dân. Những năm gần đây bằng phương pháp tiêm phòng vắc xin, bệnh VNNB đã dược khống chế. Vì thế trong phạm vi cho phép em đã làm bài tiểu luận về prôtêin tái tổ hợp và virus viêm não nhật bản để từ đó tạo ra vắc xin để phòng ngừa VNNB II. TỔNG QUAN1. Tìm hiểu về bệnh viêm não: a. bệnh nguyên b. Dịch tễ c.Sinh lý bệnh d.Lâm sàng e.Các thể lâm sàng f. Phân loại các rối loạn thần kinh trong viêm não Nhật Bản 2. Tìm hiểu về vắc-xin a. khái niệm b.Phân loại c.Cơ chế hoạt động d.Đặc tính của vắc-xin3.Phương pháp 1.Tìm hiểu về bệnh viêm nãoa. bệnh nguyên :Virus viêm não nhật bản B là một loại Arbovirus, kích thước nhỏ, đường kính 15-40nm Virus chịu đựng kém ở nhiệt độ cao Virus có thể nuôi cấy trong trứng gà lộn, trên các tổ chức tế bào phôi gà, thận khỉ, tế bào Hela.1.Tìm hiểu về bệnh viêm nãoVirus viêm não Nhật Bản B (Japanese B Encephalitis virus)1. Tìm hiểu về bệnh viêm nãob. Dịch tễSự phân bố địa cư:VNNBB đang có chiều giảm ở Trung Quốc, Nhật Bản, Cộng Hòa Triều Tiên, nhưng lại gia tăng và phát triển ở nhiều vùng Bangladesh, Burma, Indian, Nepal, Thái Lan và Việt Nam. Lý do : +Trong nông nghiệp, trồng lúa sử dụng nhiều thuốc diệt sâu chuột và phát triển các trại chăn nuôi heo. +Sự thay đổi điều kiện kinh tế xã hội gồm có sự thay đổi vị trí trồng lúa ở các vùng đất khô và đẩy mạnh chăn nuôi heo làm nguồn thực phẩm lớn +Khí hậu, tác dụng của nhiệt độ và lượng mưa. +Tác dụng tiêm chủng trên người và lợn. +Có thể có vai trò phụ thêm của các vật chủ truyền bệnh ngoài heo và lợn.1. Tìm hiểu về bệnh viêm não Ổ virus :Ở Việt Nam có hai nhóm chim có khả năng truyền bệnh + Nhóm chim sống trong làng mạc, lũy tre, trên cây an quả : chim bông lau, chim rẽ quạt, chim sẻ nhà, liêu điêu, chim khách, chim chích chòe. + Nhóm chim kiếm ăn ngoài đồng, ít vào trong làng : cò, sáo, quạ, cu gáy, chim chèo bẻo.Ngoài ra còn có một số loại súc vật khác bị nhiễm trùng tiềm tàng ( không phải loại có vú)1. Tìm hiểu về bệnh viêm não Đường lây truyền bệnh viêm não Nhật Bản. 1. Tìm hiểu về bệnh viêm nãoTrung gian truyền bệnh : +Chủ yếu là muỗi Culex tritaeniorhyncus +Ngoài ra phải kể đến ba loại culex khác : vishnui, pseudovishnui ở Ấn Độ và annulirostris ở Guam +Lợn tham gia vào dây truyền bệnh thường dướng dạng nhiễm trùng thể ẩn 1. Tìm hiểu về bệnh viêm nãoTuổi và phái tính: +Trẻ em hay mắc bệnh VNNBB nhưng tỉ lệ mắc bệnh theo lứa tuổi đã thay đổi từ năm này sang năm khác và tùy theo nước. + Tuổi càng cao kháng thể càng cao. Người lớn ít mắc bệnh VNNBB vì đã được miễn dịch. Mùa : Bệnh thường xảy ra vào mùa hè nóng bức. Ở Việt Nam vào các tháng 6-7-8. Bệnh tản phát nhiều hơn thành dịch. Ở Nhật Bản bệnh phát triển vào giữa mùa hè, từ tháng 7 đến tháng 10, nhiều nhất trong hai tháng 8 va 9. Từ tháng 10 trở đi mật độ muỗi giảm nhiều và dịch kết thúc 1. Tìm hiểu về bệnh viêm nãoc. Sinh lý bệnh: 2 giai đoạn Nhiễm virus huyết : trong giai đoạn này chỉ có dấu hiệu toàn thân, không có triệu chứng đặc hiệu nên tất khó chuẩn đoán Xâm nhiễm hệ thần kinh gây nhiều biểu hiện tinh thần kinh phong phú 1. Tìm hiểu về bệnh viêm nãod. Lâm sàng: +Nung bệnh :Trung bình một tuần, tối thiểu 5 ngày, tối đa 15 ngày +Khởi phát : từ 1 đến 4 ngày, ngắn nhất 12 giờ -Hội chứng nhiễm trùng - Hội chứng tinh thần kinh +TOÀN PHÁT  -Hội chứng tinh thần kinh -Hội chứng nhiễm trùng +DIỄN TIẾN -Tối cấp -Cấp : tử vong, khỏi, có di chứng1. Tìm hiểu về bệnh viêm nãoe. Các thể lâm sàng +Thể điển hình -Thể não- màng não -Thể viêm màng não đơn thuần -Thể giống thương hàn -Thể thô sơ  +Thể không điển hình -Thể liệt hành tủy -Thể tủy sống -Thể tiếp sau chấn thương -Thể rối loạn thần kinh kéo dài 1. Tìm hiểu về bệnh viêm nãof. Phân loại các rối loạn thần kinh trong viêm não Nhật Bản +Dị thường vận động và tinh thần ; 6 nhóm -Giảm động  -Tăng động -Trạng thái hỗn hợp vừa tăng động, giảm động -Nhóm Parkinson -Trạng thái hỗn hợp 2 nhóm tăng động và Parkinson -Nhóm khẩn trương +Trạng thái quá độ từ bán cấp sang mãn tính. +Di chứng thần kinh-tinh thần trong giai đoạn mãn tính. 2. Tìm hiểu về vắc-xina.Khái niệm: Vắc-xin là chế phẩm có tính kháng nguyên dùng để tạo miễn dịch đặc hiệu chủ động, nhằm tăng sức đề kháng của cơ thể đối với một (số) tác nhân gây bệnh cụ thể. 2. Tìm hiểu về vắc-xinb. Phân loại: +Vắc-xin thế hệ thứ nhất -Vắc-xin bất hoạt -Vắc-xin vi khuẩn, virus sống, giảm độc lực: -Vắc-xin có nguồn gốc từ độc tố anatoxin +Vắc-xin thế hệ thứ 2 +Vắc-xin thế hệ thứ 3: 2. Tìm hiểu về vắc-xinc. Cơ chế hoạt động: Hệ miễn dịch nhận diện vắc-xin là vật lạ nên hủy diệt chúng và "ghi nhớ" chúng. Về sau, khi tác nhân gây bệnh thực thụ xâm nhập cơ thể, hệ miễn dịch đã ở tư thế sẵn sàng để tấn công tác nhân gây bệnh nhanh chóng hơn và hữu hiệu hơn . Đây chính là các ưu điểm của đáp ứng miễn dịch đặc hiệu.2. Tìm hiểu về vắc-xind.Đặc tính của vắc-xin:An toàn Hiệu lực Tính kháng nguyên Tính miễn dịch 3. Phương phápLi trích DNA của dòng JaOarS982Mồi oligonucletid được tổng hợp tiêu biểu cho đầu 3’ và kết thúc đầu 5’ của bộ gien dòng JaOarS982 của JEV ( nguồn gốc la JEC). Trình tự gốc của JEV được mô tả bởi SimiyoshiSợi tổng hợp đầu tiên được thực hiện bằng cách sử dụng đầu 3’- mối kết thúc và sử dung enzyme phiên mã ngược RNASợi kép cDNA tổng hợp bằng cách sử dụng đầu 5’-mồi. Sau đó các phân tử cDNA đươc cắt ra bở enzyme BamHI va SaliCác mảnh nhỏ đươc chèn vào pBR322Một thư viện cDNA đươc xây dựng bằng cách chuyển vào tế bào vi khuẩn E coli để cho nó nhân lênSau khi nhân lên người ta li trich để lấy các mảnh DNA cần thiết raSau đó người ta lấy các mảnh nhỏ đầu 5’ đoạn từ pM433 gắn với mảnh đầu 3’ từ pH756, pH313, pH173, pH756X ( các virus này có tính độc nhỏ hơn so với JEV gốc nên đươc nhân lên để dùng làm vaccine)Sau đó chúng được nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng thích hợp ( tế bào thận chuột) để thu sinh khối.III. KẾT LUẬNVNNBB là một bệnh nhiễm trùng thần kinh đăc biệt nghiêm trọng cơ thể gây ra dịch vào mùa hè. đây là căn bệnh đã gây ra tỉ lệ tử vong rất cao ở trẽ em khi măc bệnh này. Đặc biệt nó còn để lại những di chứng nặng nề cho nhừng bênh nhân. Vì thế mà thế giới giới tất chú ý tới việc tiêu diệt căn bệnh nàyNgày này với trang thiết bị kĩ thuật hiện đại con người đã chế tạo ra đươc nhiều loại vắc-xin để chủng ngừa căn bệnh này. Và phương pháp protein tái tổ hợp là một trong những phương pháp để tạo ra vắc-xin phòng VNNBB