Bài giảng Các kỹ thuật ELISA

Các kỹ thuật ELISATổng quanELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay, enzyme immunoassay, EIA): Là kỹ thuật chẩn đoán dựa trên miễn dịch học rất phổ biến trong rất nhiều lĩnh vực.Ưu điểm: dễ thực hiện, tốc độ nhanh, chi phí thấp, dễ sản xuất, an toàn với độ nhạy và độ đặc hiệu chấp nhận đượcRIALiên kết kháng nguyên/kháng thể với enzymeCố định kháng nguyên/kháng thểELISANguyên lý cơ bảnAgNguyên lý cơ bảnAgCác biến thểELISA dị pha (ELISA pha rắn)ELISA trực tiếp (direct ELISA)ELISA gián tiếp (indirect ELISA)ELISA sandwichELISA cạnh tranh (competitive ELISA)ELISA đồng phaELISA đồng pha cạnh tranh (competitive)ELISA đồng pha không cạnh tranh (non-competitive)ELISA trực tiếpAgAgAgELISA gián tiếpAgAgAgELISA sandwichAgAgAgELISA cạnh tranhAgAgAgAgcAgcAgcAgcAgcPhương pháp 1ELISA cạnh tranhAgcAgAgcAgcAgAgcAgAgcPhương pháp 1ELISA cạnh tranhAgcAgcAgcAgcAgcAgcAgAgAgPhương pháp 2ELISA cạnh tranhAgAgAgAgcAgcAgcAgcAgcPhương pháp 3ELISA cạnh tranhAgcAgcAgcAgcAgcAgAgAgPhương pháp 3ELISA đồng pha không cạnh tranhAgPhương pháp 1ELISA đồng pha không cạnh tranhAgPhương pháp 2ELISA đồng pha cạnh tranhAgcPhương pháp 1ELISA đồng pha cạnh tranhAgcAgPhương pháp 1ELISA đồng pha cạnh tranhPhương pháp 2AgcELISA đồng pha cạnh tranhPhương pháp 2AgcELISA đồng pha cạnh tranhPhương pháp 2AgcAgELISA đồng pha cạnh tranhPhương pháp 2AgcAgELISA đồng pha cạnh tranhPhương pháp 3AgcCofactorInhibitorAgELISA đồng pha cạnh tranhPhương pháp 3AgcAgLựa chọn kỹ thuật ELISAKhả năng tìm được kháng thể đặc hiệuYếu tố thời gianGiới hạn phát hiệnYêu cầu về độ nhạy và độ đặc hiệuCác yếu tố tùy chọn:Mức độ phức tạpĐộ an toànKhả năng hệ thống hóaChi phíTài liệu tham khảo R.H. Burdon, P.H. van Knippenberg, 1985, Laboratory Techniques In Biochemistry And Biology, 	volume 15, P. Tijssen, Practice And Theory Of Enzyme Immunoassays, Elsevier, Amsterdam, 	NetherlandsJohn M Walker, 2008, Methods In Molecular Biology, volume 516, John A. Crowther, The ELISA 	Guide Book, 2nd edition, Humana Press, Springer, New York, USAJohn M Walker, 1995, Methods In Molecular Biology, volume 42, John A. Crowther, ELISA: Theory And Practice, Humana Press, Springer, New York, USAIDEXX Laboratories, Inc., 2007, ELISA Technical Guide